北京鼎国Biotin SP-AP（生物素-链霉菌抗生物素蛋白-碱磷酶）免疫组化试剂盒适用于冰冻切片和石蜡切片上细胞表面抗原及细胞内抗原的准确、快速定位分析。同时，也可用于培养和固定的细胞、血细胞涂片的免疫组化和细胞化学分析。规格分别为5ml/100片和10ml/200片。

试剂盒组成

a)         DGSP-A-KIT-1  内源性碱性磷酸酶阻断剂工作液

b)        DGSP-A-KIT-2  正常动物非免疫血清工作液

c)         DGSP-A-KIT-3  生物素标记的第二抗体工作液

d)        DGSP-A-KIT-4  AP标记链霉菌抗生物素蛋白工作液

自备试剂及用品

a)         一抗

b)        淋洗缓冲液（鼎国生物：PBS磷酸盐缓冲液系列BF-0011/0012/0013/0014）

c)         蒸馏水

d)        复染剂（鼎国生物：AR-0711/0712/0721/0722/0771/0772）

e)         封片剂（鼎国生物：AR-0811）

f)         免疫组化用PAP笔

g)        孵育盒（鼎国生物：AR-0951/0952）

h)        定时器（鼎国生物：AR-0961/0962）

i)          显微镜

j)          BCIP/NBT显色液（鼎国生物： AR-0631/0632/0633）

染色步骤

1.    石蜡切片用二甲苯脱蜡，梯度酒精水化后，在蒸馏水中漂洗5min。

2.    用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次3min。

3.     除去PBS液，每张切片加1滴或50μl 内源性碱性磷酸酶阻断剂（试剂1），室温下孵育10-30min。

4.    用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次5min。（此步后可进行抗原修复）

5.     每张切片加1滴或50μl正常动物非免疫血清（试剂2），37℃孵育10-30min。

6.     除去血清，不洗，每张切片加1 滴或50μl的第一抗体（用户自备），室温下孵育1h或4℃过夜。

7.     用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次5min。

8.     除去PBS液，每张切片加1 滴或50μl 生物素标记的第二抗体（试剂3），37℃孵育30min。

9.     用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次5min。

10. 除去PBS液，每张切片加1滴或50μl AP标记链霉菌抗生物素蛋白（试剂4），37℃孵育30min。

11. 用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次5min。

12. 除去PBS液，每张切片加1滴或50 μl BCIP/NBT显色液，观察1-15min，阳性显色为蓝黑色。

13. BCIP/NBT 染色后，自来水冲洗，核固红复染。

14. 复染后，蒸馏水冲洗，脱水，透明，中性树胶封片。

保存和有效期：